اختبار PCR (تفاعل سلسلة البوليميريز) هو تقنية أساسية في التشخيص الجزيئي. يؤثر توحيد عمليات التغليف والاختبار بشكل مباشر على دقة النتائج وتأثيرها الحيوي. توفر هذه المقالة منظوراً مهنياً حول نقاط مراقبة الجودة الرئيسية خلال عملية اختبار PCR.
عينة الاستلام والمعالجة هي الخطوات الأولى في العملية. يجب على المختبرات التحقق الصارم من تحديد العينة ، وظروف النقل ، ووقت التخزين لضمان سلامة العينة. عند الاستلام ، يجب ترقيم العينات وتسجيلها في خزانة السلامة الحيوية وتخضع لإجراءات المعالجة قبل- مثل التحلل واستخراج الحمض النووي بناءً على نوع الاختبار. مطلوب نظام التحقق من الشخصين- خلال هذه المرحلة لمنع تلوث Cross -.
يجب إجراء إعداد نظام رد فعل PCR داخل مقعد نظيف. يجب على المشغلين ارتداء معدات الحماية من المستوى 3 واستخدام Nuclease - عن المواد الاستهلاكية المجانية. يلتزم إعداد الكاشف بمبدأ "سير العمل أحادي الاتجاه" ، والانتقال من منطقة إعداد الكاشف إلى منطقة معالجة العينة ثم إلى منطقة التضخيم. يجب تضمين الضوابط السلبية ، والضوابط الإيجابية ، والضوابط الداخلية في كل دفعة تفاعل لمراقبة الصلاحية التجريبية.
أثناء مرحلة التضخيم والاختبار ، يجب أن يكون أداة PCR قبل معايرة معايير ركوب الدراجات والتحقق من درجة الحرارة. يتضمن إجراء التفاعل عادة ثلاث خطوات: تمسخ (94 - 95 درجة) ، الصلب (50-65 درجة) ، وتمديد (72 درجة). يتم ضبط عدد الدورات بناءً على هدف الكشف. يتطلب PCR في الوقت الحقيقي PCR أيضًا مراقبة عتبة إشارة الإسفار لقنوات محددة.
يجب إجراء تحليل النتائج وتقاريرها من قبل الفنيين المؤهلين. يجب مراجعة البيانات الخام من قبل اثنين على الأقل من المهنيين لتأكيد مورفولوجيا منحنى التضخيم ، ومعقولية قيمة التصوير المقطعي ، والامتثال لمواد مراقبة الجودة مع المعايير. يجب أن يتضمن التقرير النهائي معلومات حول منهجية الاختبار ، وأساس تفسير النتائج ، وبيان قيود الاختبار.
تلتزم العملية بأكملها بصرامة مع ISO 15189 ومواصفات CDC ذات الصلة. يتم تنفيذ نظام ضمان ثلاثي للمراقبة البيئية ، وصيانة المعدات ، وتدريب الموظفين لضمان موثوقية وتتبع اختبار PCR.